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伯樂電穿孔儀165-2661使用說明

詳情

質(zhì)保3年只換不修，廠家長沙實了個驗儀器制造有限公司

一、儀器簡介

伯樂電穿孔儀 165-2661 是一款新一代高性能電轉(zhuǎn)化儀器，用于基因?qū)搿⒓?xì)胞轉(zhuǎn)染、蛋白質(zhì)傳遞以及藥物遞送等生物實驗。
該設(shè)備基于電穿孔原理，通過短時間高壓脈沖在細(xì)胞膜上產(chǎn)生可逆性微孔，使外源分子能夠穿透細(xì)胞膜進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)部。

165-2661 型號在前代 165-2660 的基礎(chǔ)上進(jìn)行了系統(tǒng)升級：

電壓控制更精確；
輸出波形更穩(wěn)定；
數(shù)據(jù)存儲容量更大；
安全保護(hù)系統(tǒng)更加完善。

該儀器廣泛應(yīng)用于分子生物學(xué)、細(xì)胞工程、醫(yī)學(xué)基因研究及生物制藥開發(fā)等領(lǐng)域，是科研和教學(xué)中不可或缺的核心設(shè)備之一。

二、技術(shù)參數(shù)

項目	參數(shù)說明
輸出電壓范圍	10–3500 V（可連續(xù)調(diào)節(jié)）
電容范圍	25–3275 μF
電阻范圍	50–1000 Ω 或 ∞
波形類型	指數(shù)衰減波、方波
脈沖次數(shù)	1–10 次可設(shè)
時間常數(shù)	0.05–10 ms
放電能量誤差	±2%
顯示方式	4.3 英寸液晶顯示屏
電源要求	AC 220 V ±10%，50/60 Hz
重量	約 8 kg
尺寸	310 × 280 × 160 mm
工作環(huán)境溫度	15–30℃
相對濕度	30–70%

三、結(jié)構(gòu)組成

伯樂電穿孔儀 165-2661 采用模塊化設(shè)計，主要由以下部分構(gòu)成：

1. 主機(jī)系統(tǒng)

包括高壓電源、能量儲存電容、波形控制電路、主控芯片和散熱模塊，是整機(jī)的能量與控制核心。

2. ShockPod 電擊槽

用于放置電擊杯，是電能傳遞與放電的執(zhí)行部件。ShockPod 內(nèi)置安全蓋鎖檢測裝置，可防止未鎖閉時放電。

3. 模塊接口區(qū)

后部設(shè)有模塊插槽，可根據(jù)實驗需求插入 CE（電容擴(kuò)展）或 PC（脈沖控制）模塊。

4. 操作界面

前面板設(shè)有 LCD 顯示屏與按鍵區(qū)，包括：

MENU：主菜單；
ENTER：確認(rèn)操作；
SAVE：存儲參數(shù)；
PULSE：執(zhí)行放電；
方向鍵：調(diào)整參數(shù)值。

5. 安全保護(hù)系統(tǒng)

包含過壓保護(hù)、溫控保護(hù)、自動放電、蓋鎖檢測與短路保護(hù)等功能，確保實驗安全可靠。

四、工作原理

電穿孔過程的基本原理為：

在細(xì)胞懸液中施加高壓電場，使膜電位達(dá)到臨界值；
膜結(jié)構(gòu)發(fā)生暫時性重排，形成納米級可逆孔；
外源 DNA、RNA 或蛋白質(zhì)分子在電場作用下穿過膜孔進(jìn)入細(xì)胞質(zhì)；
電場解除后，細(xì)胞膜在數(shù)秒內(nèi)恢復(fù)完整性。

165-2661 的高精度脈沖控制系統(tǒng)可在毫秒級時間內(nèi)實現(xiàn)能量釋放與電壓衰減，使穿孔效果穩(wěn)定且細(xì)胞存活率高。

五、安裝與開機(jī)步驟

1. 安裝環(huán)境要求

放置于干燥、平整、防震的實驗臺；
避免陽光直射與強(qiáng)磁場干擾；
環(huán)境溫度 20–25℃，濕度 40–60%；
預(yù)留通風(fēng)空間≥10 cm。

2. 接線檢查

插好電源線并接地；
檢查 ShockPod 是否干燥；
確認(rèn)模塊接口連接牢固。

3. 開機(jī)操作

打開電源開關(guān)；
系統(tǒng)自動執(zhí)行自檢（檢測溫度、蓋鎖、電壓模塊等）；
自檢通過后屏幕顯示“READY”即進(jìn)入主界面。

六、操作流程

（一）樣品準(zhǔn)備

細(xì)胞處理：
使用對數(shù)生長期細(xì)胞，洗滌 2–3 次以去除鹽離子；
以低離子緩沖液（如 1 mM HEPES）重懸。
樣品濃度：

細(xì)菌：1×10? cells/mL；
酵母：1×10? cells/mL；
哺乳動物細(xì)胞：1×10?–1×10? cells/mL。

樣品混合：
加入外源 DNA/RNA 并輕輕混勻，冰上預(yù)冷 5 分鐘。

（二）參數(shù)設(shè)置

按“MENU”進(jìn)入設(shè)置界面，依次設(shè)定：

電壓（Voltage）：10–3500 V；
電容（Capacitance）：25–3275 μF；
電阻（Resistance）：50–1000 Ω 或 ∞；
波形類型（Waveform）：指數(shù)衰減波或方波；
脈沖次數(shù)（Pulse Count）：1–10 次。

系統(tǒng)自動計算時間常數(shù)（τ），并顯示預(yù)估能量。
設(shè)置完成后按“ENTER”確認(rèn)。

（三）電擊操作

向電擊杯中加入 80% 容積的樣品（約 0.8 mL）；
輕輕敲擊杯壁排除氣泡；
將電擊杯放入 ShockPod，關(guān)閉上蓋并確認(rèn)“咔噠”聲；
屏幕提示“LID CLOSED – SAFE TO RUN”；
按“PULSE”鍵開始充電；
當(dāng)提示“READY TO PULSE”時按“ENTER”放電；
放電結(jié)束后屏幕顯示電壓、時間常數(shù)、能量比例等結(jié)果；
屏幕出現(xiàn)“COMPLETE”后方可開蓋。

（四）樣品回收

放電后立即將樣品取出并轉(zhuǎn)入恢復(fù)培養(yǎng)基中：

細(xì)菌樣品 37℃ 復(fù)蘇 30 分鐘；
酵母樣品 30℃ 復(fù)蘇 60 分鐘；
哺乳動物細(xì)胞 37℃ 復(fù)蘇 1–2 小時。

復(fù)蘇后進(jìn)行轉(zhuǎn)化篩選或后續(xù)培養(yǎng)。

七、安全注意事項

放電操作前必須確認(rèn)蓋鎖閉合；
放電時嚴(yán)禁觸摸儀器與電擊杯；
不可使用含鹽緩沖液；
實驗間隔不少于 10 秒；
放電后等待 5 秒再開蓋；
操作人員需佩戴絕緣手套；
禁止私自拆卸主機(jī)或模塊；
若出現(xiàn)異味或閃光，應(yīng)立即斷電。

八、數(shù)據(jù)記錄與導(dǎo)出

165-2661 具備自動數(shù)據(jù)存儲功能，每次實驗完成后可自動保存參數(shù)與結(jié)果。

導(dǎo)出步驟：

插入 USB 存儲設(shè)備；
進(jìn)入菜單“Data Export”；
選擇文件格式（CSV 或 TXT）；
系統(tǒng)自動生成文件，便于數(shù)據(jù)分析與歸檔。

九、常見問題及排除

現(xiàn)象	可能原因	解決方法
無法啟動	電源未連接或保險絲燒斷	檢查電源并更換保險絲
電弧放電	樣品含鹽或有氣泡	更換低鹽 buffer、排氣泡
時間常數(shù)偏短	導(dǎo)電性過強(qiáng)	降低離子濃度
輸出電壓偏低	電源波動或模塊松動	使用穩(wěn)壓器、重新安裝模塊
波形不平滑	電極污染	清潔 ShockPod 電極
數(shù)據(jù)無法導(dǎo)出	USB 未識別	更換存儲設(shè)備
風(fēng)扇噪聲大	灰塵堆積	清理通風(fēng)口和風(fēng)扇濾網(wǎng)

十、維護(hù)與保養(yǎng)

每次實驗后清潔電擊杯與 ShockPod；
使用無水乙醇擦拭外殼，保持干燥；
每周檢查電源線、接地線及風(fēng)扇；
每月檢測輸出電壓與時間常數(shù)誤差；
每年由專業(yè)人員進(jìn)行系統(tǒng)校準(zhǔn)與固件升級。

注意：ShockPod 內(nèi)部必須保持干燥，任何液體進(jìn)入都可能導(dǎo)致短路或電弧放電。

十一、存放與運(yùn)輸

存放溫度：10–30℃，濕度：30–60%；
環(huán)境應(yīng)干燥通風(fēng)，無腐蝕性氣體；
長期停用時斷開電源，覆蓋防塵罩；
每月開機(jī)運(yùn)行 5 分鐘保持系統(tǒng)穩(wěn)定；
運(yùn)輸時使用原包裝箱并避免劇烈震動。

十二、實驗優(yōu)化建議

選擇適當(dāng)電場強(qiáng)度：
電場強(qiáng)度 (E=V/d) 應(yīng)控制在細(xì)胞類型允許范圍內(nèi)。

細(xì)菌：10–12 kV/cm；
酵母：6–8 kV/cm；
哺乳動物細(xì)胞：1–3 kV/cm。

波形選擇：

指數(shù)衰減波適合細(xì)菌、酵母；
方波適合哺乳動物細(xì)胞。

時間常數(shù)控制：
一般保持在 4–8 ms 范圍可獲得高導(dǎo)入率與良好存活率。
緩沖液優(yōu)化：
使用低導(dǎo)電 buffer，可顯著減少電弧風(fēng)險。
溫度控制：
電擊前預(yù)冷樣品與電擊杯，減小熱效應(yīng)。
多脈沖模式：
對敏感細(xì)胞可采用低電壓多次放電方式，提升導(dǎo)入效率并降低損傷。

十三、應(yīng)用范圍

伯樂電穿孔儀 165-2661 適用于以下實驗：

質(zhì)粒 DNA 轉(zhuǎn)化與基因克?。?/span>
真核細(xì)胞瞬時轉(zhuǎn)染與穩(wěn)定表達(dá)；
CRISPR/Cas9 系統(tǒng)導(dǎo)入；
RNA 或蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)實驗；
植物原生質(zhì)體與藻類基因?qū)耄?/span>
藥物與納米材料細(xì)胞遞送研究。

十四、性能驗證與校準(zhǔn)

每半年應(yīng)進(jìn)行一次性能驗證。

輸出電壓校準(zhǔn)：
用高壓探針測量實際電壓，誤差 ≤ ±2%。
時間常數(shù)測試：
使用標(biāo)準(zhǔn)電阻與電容模擬樣品測量 τ，誤差 ≤ ±0.05 ms。
波形監(jiān)測：
外接示波器，波形應(yīng)平滑無突變。
安全系統(tǒng)檢測：
檢查蓋鎖、過壓、過溫保護(hù)均應(yīng)正常響應(yīng)。

十五、年度維護(hù)計劃

維護(hù)內(nèi)容	周期	執(zhí)行人員	說明
ShockPod 清潔	每次使用后	操作員	清除殘留液體
電源與接地檢查	每周	實驗人員	確保安全連接
風(fēng)扇與散熱系統(tǒng)	每月	技術(shù)員	清理灰塵
輸出校準(zhǔn)	每年	工程師	校準(zhǔn)儀器精度
軟件升級	每年	工程師	更新固件版本