伯樂(lè) Gene Pulser Xcell 電穿孔儀實(shí)驗(yàn)安全指南

質(zhì)保3年只換不修，廠家長(zhǎng)沙實(shí)了個(gè)驗(yàn)儀器制造有限公司。

一、前言

伯樂(lè)（Bio-Rad）Gene Pulser Xcell 電穿孔儀是一款用于基因?qū)?、電轉(zhuǎn)化及細(xì)胞轉(zhuǎn)染實(shí)驗(yàn)的高性能設(shè)備。其核心原理是通過(guò)高壓脈沖瞬時(shí)作用于細(xì)胞懸液，使細(xì)胞膜形成可逆性微孔，從而實(shí)現(xiàn)DNA、RNA或蛋白質(zhì)等分子的導(dǎo)入。該技術(shù)具有高效率、低污染和適用范圍廣的特點(diǎn)，但由于涉及高壓瞬時(shí)放電與生物樣品處理，在操作中必須嚴(yán)格遵守安全規(guī)范。

本安全指南旨在幫助科研人員正確使用 Gene Pulser Xcell 電穿孔儀，防止安全事故、設(shè)備損壞或?qū)嶒?yàn)失敗，保障人員、儀器與實(shí)驗(yàn)環(huán)境的安全。

二、安全管理原則

1. 安全優(yōu)先原則：所有實(shí)驗(yàn)操作以人員安全為首要前提；

2. 預(yù)防為主原則：在實(shí)驗(yàn)前對(duì)風(fēng)險(xiǎn)進(jìn)行預(yù)判并采取防護(hù)措施；

3. 規(guī)范操作原則：嚴(yán)格遵守操作手冊(cè)及實(shí)驗(yàn)室安全制度；

4. 責(zé)任落實(shí)原則：明確操作者、監(jiān)督者及維護(hù)人員職責(zé)；

5. 持續(xù)培訓(xùn)原則：定期開(kāi)展儀器使用及高壓安全培訓(xùn)。

三、設(shè)備安全概述

Gene Pulser Xcell 電穿孔儀工作時(shí)電壓可達(dá)數(shù)千伏，屬于高能量瞬時(shí)放電設(shè)備。其主要潛在風(fēng)險(xiǎn)包括：

• 高壓電擊風(fēng)險(xiǎn)：若未正確接地或誤觸電極，可能造成嚴(yán)重電擊；

• 電弧與放電風(fēng)險(xiǎn)：樣品含鹽過(guò)高或有氣泡，會(huì)導(dǎo)致電弧閃擊；

• 熱損傷風(fēng)險(xiǎn)：高能脈沖可瞬間升溫，導(dǎo)致細(xì)胞或操作者燒傷；

• 機(jī)械風(fēng)險(xiǎn)：電穿孔杯破裂、樣品噴濺等可能造成意外；

• 生物風(fēng)險(xiǎn)：涉及基因操作或病原細(xì)胞時(shí)需防止生物污染。

了解設(shè)備的潛在風(fēng)險(xiǎn)，是建立安全防控體系的首要步驟。

四、實(shí)驗(yàn)前安全準(zhǔn)備

1. 實(shí)驗(yàn)室環(huán)境要求

• 電穿孔儀應(yīng)放置在干燥、通風(fēng)、無(wú)塵的實(shí)驗(yàn)環(huán)境中；

• 禁止靠近易燃、易爆、腐蝕性化學(xué)品；

• 環(huán)境濕度控制在30%–60%，防止靜電與漏電；

• 電源插座應(yīng)獨(dú)立布線(xiàn)，接地電阻不超過(guò)4Ω；

• 桌面應(yīng)平整穩(wěn)固，儀器四腳全部著地。

2. 人員防護(hù)

• 操作人員須經(jīng)過(guò)電穿孔儀安全培訓(xùn)；

• 穿戴防靜電實(shí)驗(yàn)服、絕緣手套、防護(hù)眼鏡；

• 禁止赤手觸摸電極與接線(xiàn)端；

• 長(zhǎng)發(fā)應(yīng)束起，避免觸及設(shè)備；

• 操作區(qū)域禁止飲食與隨意走動(dòng)。

3. 儀器檢查

實(shí)驗(yàn)前應(yīng)進(jìn)行系統(tǒng)檢查，確認(rèn)設(shè)備處于安全狀態(tài)：

1. 電源線(xiàn)無(wú)破損；

2. 接地線(xiàn)連接牢固；

3. 電極接口清潔無(wú)鹽分；

4. 電穿孔杯無(wú)裂痕、水漬或?qū)щ娨簹埩簦?/p>

5. 屏幕顯示正常，按鍵響應(yīng)靈敏；

6. Pulse Controller 模塊穩(wěn)固無(wú)松動(dòng)。

五、電氣安全操作要點(diǎn)

1. 接地系統(tǒng)

• 儀器必須使用三孔接地插座；

• 禁止使用延長(zhǎng)線(xiàn)或非原廠電纜；

• 在通電前使用萬(wàn)用表檢測(cè)地線(xiàn)電阻；

• 不得在儀器通電時(shí)拆裝接地線(xiàn)。

2. 通電與關(guān)機(jī)順序

1. 確認(rèn)設(shè)備連接正確 → 打開(kāi)電源 → 啟動(dòng)系統(tǒng)自檢；

2. 自檢通過(guò)后方可加載參數(shù)；

3. 實(shí)驗(yàn)完成后，關(guān)閉電源 → 拔除電纜 → 清理儀器表面；

4. 任何情況下，嚴(yán)禁帶電插拔電穿孔杯。

3. 電壓設(shè)置安全限值

• 原核細(xì)胞實(shí)驗(yàn)電壓建議不超過(guò)2.5 kV；

• 真核細(xì)胞或動(dòng)物細(xì)胞實(shí)驗(yàn)電壓不超過(guò)800 V；

• 初次實(shí)驗(yàn)應(yīng)從低電壓開(kāi)始逐步優(yōu)化；

• 若電壓設(shè)置錯(cuò)誤或顯示異常，立即停止操作。

4. 防止電弧與放電異常

• 樣品必須徹底脫鹽，避免含NaCl或KCl溶液；

• 電穿孔杯液面應(yīng)平整無(wú)氣泡；

• 若出現(xiàn)“啪”聲或火花，應(yīng)立即中止實(shí)驗(yàn)并斷電；

• 檢查電極有無(wú)氧化、樣品是否過(guò)濃。

六、生物安全要求

1. 樣品分級(jí)管理

依據(jù)實(shí)驗(yàn)室生物安全等級(jí)（BSL）規(guī)定：

• 普通質(zhì)?；蚍侵虏【鷮?shí)驗(yàn)可在BSL-1環(huán)境中進(jìn)行；

• 若涉及基因修飾、病毒載體或哺乳動(dòng)物細(xì)胞，應(yīng)在BSL-2環(huán)境下完成；

• 禁止在開(kāi)放環(huán)境中操作高風(fēng)險(xiǎn)樣品。

2. 防止污染

• 所有樣品操作在生物安全柜中完成；

• 使用無(wú)菌耗材，操作前后清潔工作臺(tái)；

• 廢棄電穿孔杯與培養(yǎng)物按生物危害廢物處理；

• 操作結(jié)束后使用75%乙醇或次氯酸鈉擦拭表面。

3. 樣品防泄漏措施

• 電擊過(guò)程中可能發(fā)生液體噴濺，需加裝防護(hù)罩；

• 電穿孔后樣品移取應(yīng)緩慢，防止產(chǎn)生氣溶膠；

• 若樣品含潛在致病因子，應(yīng)高壓滅菌后再棄置。

七、操作中安全注意事項(xiàng)

1. 電擊操作時(shí)，操作者雙手不得觸碰儀器金屬部分；

2. 電擊區(qū)應(yīng)設(shè)置警示標(biāo)識(shí)，禁止他人靠近；

3. 實(shí)驗(yàn)過(guò)程中若發(fā)現(xiàn)電弧或異常噪聲，應(yīng)立即中斷；

4. 樣品溶液不得超過(guò)電穿孔杯刻度線(xiàn)；

5. 電擊后必須等待顯示屏“Ready”提示燈亮起后方可取杯；

6. 若發(fā)生液體濺出，應(yīng)立即斷電并用無(wú)水乙醇擦拭；

7. 禁止將儀器與其他高壓設(shè)備共用插座。

八、操作后安全處理

1. 儀器清潔

• 使用無(wú)水乙醇或去離子水擦拭電極區(qū)；

• 禁止使用腐蝕性清潔劑；

• 確保完全干燥后再存放；

• 若電極有氧化斑，應(yīng)用軟布輕拭，嚴(yán)禁使用金屬刷。

2. 樣品處理

• 電擊后剩余液體應(yīng)立即滅菌；

• 使用的電穿孔杯若為一次性產(chǎn)品，按生物廢物處理；

• 若為可重復(fù)使用杯體，需徹底清洗并高溫滅菌后存放。

3. 數(shù)據(jù)記錄

實(shí)驗(yàn)完成后，應(yīng)詳細(xì)記錄：

• 操作人員姓名與日期；

• 實(shí)驗(yàn)參數(shù)與脈沖條件；

• 異?，F(xiàn)象與處理措施；

• 儀器運(yùn)行狀態(tài)與波形穩(wěn)定性。