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質(zhì)保3年只換不修，廠家長沙實(shí)了個(gè)驗(yàn)儀器制造有限公司。
伯樂（Bio-Rad）Genepulser Xcell 電穿孔儀是一款高度可靠的電轉(zhuǎn)化設(shè)備，廣泛應(yīng)用于細(xì)胞轉(zhuǎn)染、基因?qū)?、RNA干擾、蛋白質(zhì)遞送等多個(gè)研究領(lǐng)域。通過對(duì)電場和脈沖波形的精確控制，Genepulser Xcell 可以高效、安全地導(dǎo)入外源物質(zhì)，如DNA、RNA或蛋白質(zhì)，為科學(xué)實(shí)驗(yàn)提供可靠的技術(shù)保障。
在使用 Genepulser Xcell 電穿孔儀時(shí)，遵循規(guī)范的操作步驟對(duì)于確保實(shí)驗(yàn)的成功、減少細(xì)胞損傷以及提升轉(zhuǎn)化效率至關(guān)重要。本文將詳細(xì)介紹 Genepulser Xcell 電穿孔儀的標(biāo)準(zhǔn)操作步驟，從準(zhǔn)備工作、設(shè)備設(shè)置、樣品處理到實(shí)驗(yàn)完成后的操作，確保每一個(gè)環(huán)節(jié)都符合最佳操作實(shí)踐。
在開始實(shí)驗(yàn)前，首先確保實(shí)驗(yàn)室環(huán)境滿足設(shè)備運(yùn)行要求：
電源與接地：確保設(shè)備連接到穩(wěn)定的220V電源，并且接地良好。接地電阻應(yīng)小于1Ω，以確保電氣安全。
溫度與濕度：環(huán)境溫度應(yīng)控制在20℃至25℃之間，濕度不超過70%。過高的溫度和濕度可能影響設(shè)備的運(yùn)行和細(xì)胞轉(zhuǎn)染效果。
設(shè)備檢查：
確保電穿孔儀的外殼沒有損壞，所有接口完整；
檢查電極、電源線及接地線無損壞，連接牢固；
檢查設(shè)備的顯示屏、按鈕是否正常，確保無異常故障。
設(shè)備啟動(dòng)前，需要進(jìn)行自檢，確認(rèn)系統(tǒng)狀態(tài)為“OK”后，才能繼續(xù)進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。
電穿孔實(shí)驗(yàn)中，樣品準(zhǔn)備至關(guān)重要。樣品的濃度、緩沖液選擇以及處理方式都將直接影響轉(zhuǎn)化效果。
細(xì)胞類型：確保選擇適合電穿孔的細(xì)胞類型。常見的細(xì)胞類型包括大腸桿菌、酵母細(xì)胞、哺乳動(dòng)物細(xì)胞等。每種細(xì)胞類型對(duì)電場強(qiáng)度和脈沖時(shí)間的要求不同。
細(xì)胞狀態(tài)：使用對(duì)數(shù)生長期的細(xì)胞，活細(xì)胞轉(zhuǎn)染效率較高。細(xì)胞應(yīng)在短時(shí)間內(nèi)用無離子緩沖液（如HEPES緩沖液）洗滌，去除培養(yǎng)基中的離子。
細(xì)胞濃度：常見濃度為10^7–10^8個(gè)細(xì)胞/mL，避免過稀或過濃的細(xì)胞懸液。
DNA/RNA質(zhì)量：樣品應(yīng)純度高，濃度適中。通常DNA濃度控制在50–100 ng/μL，RNA濃度保持在100–200 ng/μL之間。
緩沖液選擇：使用低導(dǎo)電性緩沖液（如無Ca2?、Mg2?的HEPES緩沖液），避免離子濃度過高影響電穿孔效果。
選擇合適規(guī)格的電擊杯。常用的電擊杯間距為0.1 cm、0.2 cm和0.4 cm。不同間距適用于不同類型的細(xì)胞。
電擊杯需事先清潔，使用70%酒精擦拭并晾干，避免污染。
每次實(shí)驗(yàn)使用新的電擊杯，確保樣品純凈無污染。
打開電源，等待設(shè)備完成自檢，顯示屏上會(huì)顯示“System OK”提示。
確認(rèn)設(shè)備顯示“Ready to Start”狀態(tài)后，方可進(jìn)行實(shí)驗(yàn)操作。
根據(jù)實(shí)驗(yàn)類型選擇相應(yīng)的模式，Genepulser Xcell 提供了多種預(yù)設(shè)模式，包括：
細(xì)菌轉(zhuǎn)化模式（E. coli Transformation）
酵母電轉(zhuǎn)化模式（Yeast Transformation）
哺乳動(dòng)物細(xì)胞轉(zhuǎn)染模式（Mammalian Electroporation）
植物原生質(zhì)體模式（Plant Protoplast Mode）
細(xì)胞融合模式（Cell Fusion Mode）
選擇合適的模式后，設(shè)備會(huì)自動(dòng)推薦適用的電壓和脈沖時(shí)間范圍，用戶可以根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求進(jìn)行微調(diào)。
電壓范圍通常在10V到2500V之間，具體電壓取決于細(xì)胞類型和實(shí)驗(yàn)需求。
對(duì)于大腸桿菌等細(xì)菌，一般選擇較高的電壓（1800V至2500V）；
對(duì)于哺乳動(dòng)物細(xì)胞，建議電壓范圍為250V至850V。
脈沖時(shí)間通常設(shè)定為1–10 ms，時(shí)間過長可能會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞死亡。對(duì)于不同類型的細(xì)胞，時(shí)間設(shè)置也有所不同。對(duì)于細(xì)菌，脈沖時(shí)間較短，而對(duì)于哺乳動(dòng)物細(xì)胞，脈沖時(shí)間適當(dāng)延長可以提高轉(zhuǎn)染效果。
若實(shí)驗(yàn)需要多脈沖組合模式，用戶可以設(shè)定脈沖次數(shù)和間隔時(shí)間，通常設(shè)置脈沖間隔為1–2秒，防止細(xì)胞過熱。
設(shè)置完電壓、時(shí)間等參數(shù)后，可以選擇將實(shí)驗(yàn)方案保存，以便下次直接調(diào)用。
將準(zhǔn)備好的細(xì)胞懸液加入電擊杯中。每次加載的樣品體積通常為40–80μL，電擊杯的容量不可超過最大推薦值。
確保樣品沒有氣泡，可以輕輕拍打電擊杯底部來去除氣泡。氣泡會(huì)影響電場的均勻分布，導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)失敗。
將電擊杯插入電極槽，確保連接緊密，電極無松動(dòng)。
確保電極與樣品完全接觸，避免接觸不良導(dǎo)致脈沖輸出不穩(wěn)定。
關(guān)閉安全蓋，系統(tǒng)會(huì)自動(dòng)檢測蓋板是否鎖定。若蓋板未正確鎖定，設(shè)備會(huì)提示“Cover Not Closed”，并無法開始實(shí)驗(yàn)。
在確認(rèn)所有參數(shù)設(shè)置無誤后，按下“Start”按鈕，設(shè)備開始充電并自動(dòng)放電。
顯示屏將實(shí)時(shí)顯示放電電壓、電流以及時(shí)間進(jìn)度。
電壓和電流值會(huì)實(shí)時(shí)顯示在屏幕上。用戶可以觀察電壓是否穩(wěn)定，確保放電過程順利。
放電完成后，設(shè)備會(huì)自動(dòng)提示“Pulse Complete”，并顯示本次實(shí)驗(yàn)的參數(shù)與結(jié)果。
放電完成后，立即取出電擊杯，將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至復(fù)蘇培養(yǎng)基中。
混合均勻并孵育10分鐘以幫助細(xì)胞恢復(fù)膜的完整性，之后可進(jìn)行后續(xù)培養(yǎng)。
設(shè)備會(huì)自動(dòng)記錄每次實(shí)驗(yàn)的電壓、脈沖時(shí)間、電流等關(guān)鍵數(shù)據(jù)。實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)可以通過設(shè)備界面查看，或通過USB接口導(dǎo)出到外部存儲(chǔ)設(shè)備（如計(jì)算機(jī)）。
導(dǎo)出數(shù)據(jù)文件通常為CSV格式，可導(dǎo)入到數(shù)據(jù)分析軟件中進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。
數(shù)據(jù)包括實(shí)驗(yàn)參數(shù)、放電時(shí)間、波形曲線等，幫助科研人員分析實(shí)驗(yàn)的效果。
實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，用蒸餾水清洗電擊杯，并用70%酒精擦拭，確保沒有殘留樣品。
清潔電極表面，避免鹽分或其他污染物積聚。
用濕布清潔設(shè)備外部，確保無灰塵和污染物。
檢查設(shè)備接口是否松動(dòng)，確保連接穩(wěn)固。
在長期不使用時(shí)，將設(shè)備斷電，并覆蓋防塵罩。
定期檢查設(shè)備狀態(tài)，確保設(shè)備正常工作。
操作人員應(yīng)佩戴防靜電手環(huán)，避免靜電損壞設(shè)備。
電壓較高時(shí)，避免直接觸摸電極或電擊杯。
若設(shè)備發(fā)生異常（如電弧、電壓波動(dòng)），立即按下“Stop”按鈕停止操作。
出現(xiàn)故障時(shí)，及時(shí)聯(lián)系售后服務(wù)團(tuán)隊(duì)進(jìn)行排查。
避免將高濃度鹽溶液或高電導(dǎo)率緩沖液直接用于電穿孔實(shí)驗(yàn)。
嚴(yán)格遵循實(shí)驗(yàn)室生物安全標(biāo)準(zhǔn)處理廢棄物。
通過遵循上述標(biāo)準(zhǔn)操作步驟，用戶可以高效、安全地使用 Genepulser Xcell 電穿孔儀進(jìn)行細(xì)胞轉(zhuǎn)化、基因?qū)氲葘?shí)驗(yàn)。每個(gè)環(huán)節(jié)的精細(xì)操作不僅有助于提高轉(zhuǎn)化效率，還能延長設(shè)備壽命。質(zhì)保期內(nèi)，設(shè)備由長沙實(shí)了個(gè)驗(yàn)儀器制造有限公司提供“只換不修”服務(wù)，確保用戶在使用過程中的設(shè)備穩(wěn)定性與安全性。
借助這一強(qiáng)大且易用的設(shè)備，科研人員能夠更加精確、便捷地完成基因轉(zhuǎn)化、RNA干擾、蛋白質(zhì)遞送等研究任務(wù)，推動(dòng)生命科學(xué)研究向更高水平發(fā)展。
杭州實(shí)了個(gè)驗(yàn)生物科技有限公司
